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Las micotoxinas son metabolitos tóxicos producidos por mohos, que tienen una fuerte carcinogenicidad y reducen la inmunidad. Las micotoxinas comunes incluyen principalmente aflatoxinas, ocratoxinas, DON, tricotecenos (toxina T-2), zearalenona, fusarium moniliformina, fumonisinas, etc. Los cereales y los piensos se contaminan fácilmente con micotoxinas, y este problema se ha convertido cada vez más en un problema importante que no se puede ignorar en producción agrícola moderna.
Welch Materials ha desarrollado una serie de productos de columnas de inmunoafinidad para micotoxinas con su sólida capacidad de investigación científica y su avanzada tecnología de producción. Aplicable a varios laboratorios de pruebas, instituciones de importación y exportación, etc.
Generalmente, una columna de inmunoafinidad completa consta de 6 partes:
• Tubo de columna (1 ml/3 ml)
• Fase estacionaria (gel de agarosa)
• Anticuerpos (anticuerpos específicos acoplados a agar)
• Solución protectora (generalmente una solución tampón para mantener húmedo el agar)
• frita y tapas superior e inferior (para evitar la pérdida de fluido de la columna)
La tecnología de columna de inmunoafinidad es tecnología de cromatografía de inmunoafinidad, que es una tecnología de purificación que simplifica el proceso de extracción de muestras y mejora efectivamente la pureza de la muestra en el proceso de pretratamiento de la muestra. Debido a su fuerte especificidad, pertenece a la detección de trazas en el análisis de alimentos y el límite de detección es muy bajo. Las columnas de inmunoafinidad Welchom® se utilizan para separar y purificar micotoxinas de muestras en función de la reacción específica entre antígenos y anticuerpos. Los anticuerpos de la columna de inmunoafinidad se suspenden en el gel mediante enlaces covalentes y adsorben específicamente las micotoxinas de la muestra. Si la muestra para la detección contiene micotoxinas, las toxinas son capturadas y unidas por el anticuerpo a medida que la muestra pasa a través de la columna de inmunoafinidad. Todas las demás sustancias se lavan de la columna de inmunoafinidad. Se utilizó metanol como eluyente y las micotoxinas se eluyeron de los anticuerpos.
Antes de su uso, restablezca la columna de afinidad a temperatura ambiente, deje salir la solución protectora de la columna y luego lleve a cabo el proceso de carga, lavado y elución de la muestra.
Cuando la muestra es compleja (como muestras con alto contenido de proteínas, alto contenido de aceite o muestras ácidas), el extracto se puede extraer dos veces para mejorar el efecto de extracción.
La velocidad de la muestra que pasa a través de la columna y la elución con metanol debe ser lenta y uniforme, aproximadamente 1-2 gotas por segundo.
La temperatura óptima para la reacción antígeno-anticuerpo es de unos 25°C. La temperatura ambiente requerida para el experimento es preferiblemente temperatura ambiente de 24°C-28°C. Una temperatura demasiado alta o demasiado baja tendrá un cierto impacto en la tasa de recuperación de la columna de afinidad. . Es necesario devolver la columna de afinidad a temperatura ambiente antes de experimentar.
La columna de afinidad no debe estar en estado anhidro, el agar es fácil de secar y encoger, lo que afectará la calidad de la columna de afinidad.
Las condiciones de almacenamiento de la columna de afinidad son 4 ℃ -8 ℃. Recuerde que la baja temperatura por debajo de 0 °C afectará gravemente a la estructura física de la columna de afinidad y a la calidad de la columna de afinidad porque el tampón se congela.
Generalmente se selecciona metanol como reactivo para la elución. Para mejorar el efecto de elución, se puede aumentar el volumen de metanol.
Después de purificar el líquido de la muestra mediante una columna de inmunoafinidad, es mejor pasar el eluato a través de un filtro de tamaño de poro de 0,45 μm o menor.
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