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Las micotoxinas son metabolitos tóxicos producidos por mohos, que tienen una fuerte carcinogenicidad y reducen la inmunidad. Las micotoxinas comunes incluyen principalmente aflatoxina, ocratoxina, DON, tricotecenos (toxina T-2), zearalenona, fusarium moniliformina, fumonisinas, etc. Los cereales y los piensos se contaminan fácilmente con micotoxinas, y este problema se ha convertido cada vez más en un problema importante que no se puede ignorar en producción agrícola moderna.
Welch Materials ha desarrollado una serie de productos de columna de inmunoafinidad para micotoxinas con su sólida fuerza de investigación científica y tecnología de producción avanzada. Aplicable a varios laboratorios de prueba, instituciones de importación y exportación, etc.
Generalmente, una columna de inmunoafinidad completa consta de 6 partes:
• Tubo de columna (1mL/3mL)
• Fase estacionaria (gel de agarosa)
• Anticuerpos (anticuerpos específicos acoplados a agar)
• Solución protectora (generalmente una solución tampón para mantener húmedo el agar)
• frita y tapas superior e inferior (para evitar la pérdida de fluido de la columna)
La tecnología de columna de inmunoafinidad es una tecnología de cromatografía de inmunoafinidad, que es una tecnología de purificación que simplifica el proceso de extracción de muestras y mejora de manera efectiva la pureza de la muestra en el proceso de pretratamiento de muestras. Debido a su fuerte especificidad, pertenece a la detección de trazas en el análisis de alimentos y el límite de detección es muy bajo. Las columnas de inmunoafinidad Welchom® se utilizan para separar y purificar micotoxinas de muestras en función de la reacción específica entre antígenos y anticuerpos. Los anticuerpos en la columna de inmunoafinidad se suspenden en el gel mediante enlace covalente y adsorben específicamente las micotoxinas en la muestra. Si la muestra para detección contiene micotoxinas, las toxinas son capturadas y unidas por el anticuerpo a medida que la muestra pasa a través de la columna de inmunoafinidad. Todas las demás sustancias se lavan de la columna de inmunoafinidad. Se usó metanol como eluyente y las micotoxinas se eluyeron de los anticuerpos.
Antes de usar, restaure la columna de afinidad a temperatura ambiente, deje salir la solución protectora de la columna y luego lleve a cabo el proceso de carga, lavado y elución de la muestra.
Cuando la muestra es una muestra compleja (como muestras ricas en proteínas, ricas en aceite, ácidas), el extracto se puede extraer dos veces para mejorar el efecto de extracción.
La velocidad de la muestra que pasa a través de la columna y la elución del metanol debe ser lenta y uniforme, aproximadamente 1-2 gotas por segundo.
La temperatura óptima para la reacción antígeno-anticuerpo es de unos 25°C. La temperatura ambiente requerida para el experimento es preferiblemente la temperatura ambiente 24°C-28°C. Una temperatura demasiado alta o demasiado baja tendrá un cierto impacto en la tasa de recuperación de la columna de afinidad. . La columna de afinidad debe volver a la temperatura ambiente antes de experimentar
La columna de afinidad no debe estar en estado anhidro, el agar es fácil de secar y contraer, lo que afectará la calidad de la columna de afinidad.
Las condiciones de almacenamiento de la columna de afinidad son de 4 ℃ a 8 ℃. Recuerde que la baja temperatura por debajo de 0°C afectará seriamente la estructura física de la columna de afinidad y la calidad de la columna de afinidad porque el tampón se congela.
Generalmente se selecciona metanol como reactivo para la elución. Para mejorar el efecto de elución, se puede aumentar el volumen de metanol.
Después de purificar el líquido de la muestra mediante una columna de inmunoafinidad, es mejor pasar el eluato a través de un filtro de tamaño de poro de 0,45 μm o menor.
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