La cromatografía de afinidad es un tipo de tecnología de cromatografía especial que utiliza la afinidad específica entre la sustancia a separar y el ligando para lograr la separación de acuerdo con la interacción específica entre las moléculas biológicas. Tales como antígeno y anticuerpo, ADN y ARN, enzima y sustrato o inhibidor, etc.

Hay dos tipos de métodos de elución, a saber, elución específica y elución no específica.

Especificidad del proceso de elución, puede elegir una sustancia y un ligando de fuerte afinidad para unirse al eluyente, la sustancia y mantenerse separados de la competencia del ligando, en condiciones apropiadas, como la concentración de la sustancia con un ligando de fuerte afinidad o mayor, los ligandos son básicos. por el material, el original y el ligando que se une al material de separación se reemplazan del ligando, de modo que se eluye; También puede elegir un tipo de material de aislamiento que tenga una fuerte afinidad por el material para unirse al eluyente, este tipo de material con ligando para tratar el material de separación, la combinación de competencia en condiciones apropiadas, como el material de aislamiento de la sustancia, mantiene una fuerte afinidad o concentración. El material más grande y separado es básico y está fuera de la unión del ligando por este tipo de material, que se eliminó. La elución específica suele ser suave y es más probable que conserve la actividad de la proteína. Las desventajas de este método son la elución lenta, el ancho del pico y la necesidad de eliminar el medio competidor de la proteína recuperada.

Para la elución no específica, las condiciones de elución deben optimizarse de acuerdo con el mecanismo de interacción entre el ligando y la proteína, como el aumento de la concentración de sal, la disminución de la interacción iónica o el cambio del estado de protonación/ionización al cambiar el pH, para ajustar la fuerza del enlace de hidrógeno, la interacción hidrofóbica. e interacción electrostática. Por ejemplo, se puede eluir un anticuerpo de una proteína G fija cambiando el pH, pero la afinidad de la proteína G por el anticuerpo es tan fuerte que se requieren diferentes combinaciones de condiciones de elución para lograr la máxima liberación de anticuerpos.

Welch Materials está disponible para materiales de relleno de cromatografía de afinidad

◌ Medio de afinidad de anticuerpos Proteína G Tanrose 4 FF

◌ Ni Tanrose 6 FF (NTA/IDA)/Ni Tanrose 6 HP (NTA)/Ni Tanrose 4 FF (NTA/IDA) medio de afinidad de quelatos metálicos

◌ Medio de afinidad de quelatos metálicos Co Tanrose 6 FF (NTA)

◌ IMAC Tanrose 6 FF/Chelating Tanrose 6 FF medio de afinidad de quelatos metálicos

◌ Benzamidina Tanrose 4FF Medio de afinidad de benjia amidina

◌ Medio de afinidad de glutatión GST Tanrose 4 FF

◌ Heparin Tanrose 6 FF/Heparin Tanrose 6 HP Medio de afinidad con heparina

◌ Endotoxina rem Tanrose 4 FF Materiales de empaque de afinidad de endotoxina

◌ NHS – Tanrose 4 FF activado/CNBr – Tanrose 4 FF activado antes de los materiales de embalaje de afinidad de activación

Welch Materials ofrece columnas precargadas para su elección

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