La cromatografía de afinidad es un tipo de tecnología de cromatografía especial que utiliza la afinidad específica entre la sustancia que se va a separar y el ligando para lograr la separación de acuerdo con la interacción específica entre moléculas biológicas. Como antígeno y anticuerpo, ADN y ARN, enzima y sustrato o inhibidor, etc.

Hay dos tipos de métodos de elución, a saber, elución específica y elución no específica.

La especificidad del proceso de elución, puede elegir una sustancia y un ligando de fuerte afinidad para unirse al eluyente, la sustancia y permanecer separada de la competencia del ligando, en condiciones apropiadas, como la concentración de la sustancia con un ligando de fuerte afinidad o mayor, los ligandos son básicos. mediante el material, el original y el ligando que se une al material de separación se reemplazan fuera del ligando, de modo que se eluye; También se puede elegir un tipo de material de aislamiento que tenga una fuerte afinidad por el material para unirse al eluyente, este tipo de material con ligando para tratar el material de separación, la combinación de competencia en condiciones apropiadas, como que el material de aislamiento de la sustancia mantenga una fuerte afinidad o concentración es El material más grande y separado es básico y está fuera del ligando que se une mediante este tipo de material, que fue eliminado. La elución específica suele ser suave y es más probable que preserve la actividad proteica. Las desventajas de este método son la elución lenta, la anchura del pico y la necesidad de eliminar el medio competidor de la proteína recuperada.

Para la elución no específica, las condiciones de elución deben optimizarse de acuerdo con el mecanismo de interacción entre el ligando y la proteína, como aumentar la concentración de sal, disminuir la interacción iónica o cambiar el estado de protonación/ionización cambiando el pH, para ajustar la fuerza del enlace de hidrógeno y la interacción hidrofóbica. e interacción electrostática. Por ejemplo, un anticuerpo se puede eluir de una proteína G fija cambiando el pH, pero la afinidad de la proteína G por el anticuerpo es tan fuerte que se requieren diferentes combinaciones de condiciones de elución para lograr la máxima liberación de anticuerpo.

Welch Materials está disponible para materiales de embalaje de cromatografía de afinidad

◌ Medio de afinidad del anticuerpo Proteína G Tanrose 4 FF

◌ Medio de afinidad de quelato metálico Ni Tanrose 6 FF (NTA/IDA)/Ni Tanrose 6 HP (NTA)/Ni Tanrose 4 FF (NTA/IDA)

◌ Medio de afinidad de quelato metálico Co Tanrose 6 FF (NTA)

◌ IMAC Tanrose 6 FF/Chelating Tanrose 6 FF medio de afinidad de quelato metálico

◌ Benzamidina Tanrose 4FF medio de afinidad de benjia amidina

◌ Medio de afinidad por glutatión GST Tanrose 4 FF

◌ Heparina Tanrose 6 FF/Heparina Tanrose 6 HP Medio de afinidad por heparina

◌ Endotoxina rem Tanrose 4 FF Materiales de embalaje de afinidad de endotoxina

◌ NHS – Tanrose 4 FF activado/CNBr – materiales de embalaje de afinidad de preactivación de Tanrose 4 FF activado

Welch Materials ofrece columnas precargadas para su elección

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