Introducción al gel de agarosa

Basado en el principio de la cromatografía de filtración en gel, el requisito más básico para su medio es que no puede tener ninguna otra interacción con los componentes de la materia prima excepto exclusión, como efecto de carga, efecto químico, efecto biológico, etc. La filtración en gel ideal El medio tiene una alta resistencia física y estabilidad química, puede soportar altas temperaturas y altas presiones y ácidos y álcalis fuertes, tiene alta inercia química, distribución estrecha del tamaño de los poros internos y uniformidad del tamaño de las partículas en forma de perla. Actualmente, los más utilizados son sefarosa, gel de agarosa, gel de poliacrilamida, etc.

El gel de agarosa se deriva de un tipo de agar polisacárido de algas marinas, que es un gel natural, no entrecruzado covalentemente, por lo que la energía de enlace del entrecruzamiento por enlace de hidrógeno es relativamente débil. A diferencia del dextrano, la porosidad se logra variando la concentración de agarosa. La estabilidad química del gel de agarosa no es tan buena como la de la sefarosa. El gel de agarosa no tiene gel seco y debe almacenarse en un estado hinchado. A excepción de la acetona y el etanol, el gel de agarosa se destruirá cuando se encuentre con agentes deshidratantes, agentes congelantes y algunos solventes orgánicos. Las condiciones de trabajo adecuadas para la operación de separación con gel de agarosa son pH4.5-9 y temperatura 0-40℃. El gel de agarosa tiene un efecto de adsorción sobre el borato, por lo que no se puede usar el tampón de ácido bórico.

Las partículas de gel de agarosa son muy débiles y deben manipularse con mucho cuidado. Además, debido a la pequeña elasticidad de las partículas de agarosa, la presión causada por la altura de la columna puede provocar deformaciones, lo que da como resultado una velocidad de flujo reducida o incluso un bloqueo, así que intente ajustar la presión de la columna cuando la empaquete. El gel de agarosa no tiene grupos cargados, por lo que la fuerza de adsorción no específica de las sustancias proteicas es significativamente menor que la de la sefarosa. No hay una adsorción obvia cuando la concentración de iones del medio es superior a 0,1 mol/L.

La característica del gel de agarosa es que puede separar decenas de miles a decenas de millones de sustancias de alto peso molecular. El rango de separación disminuye con el aumento de la concentración de gel, pero la fuerza de las partículas aumenta con el aumento de la concentración. Es especialmente adecuado para ácidos nucleicos, polisacáridos y La separación de sustancias proteicas compensa las deficiencias del gel de poliacrilamida y el gel de dextrano y amplía el rango de aplicación.

El nombre del gel de agarosa de Welch Materials es Tanrose. A continuación se presentan los productos de la serie Tanrose Fast Flow.

Serie de flujo rápido Tanrose

Tanrose 4FF y Tanrose 6FF son medios de filtración en gel obtenidos por emulsificación, lavado y tamizado de agarosa al 4% y al 6% respectivamente. El medio tiene buena estabilidad física y química. Los medios pueden apagarse con hidróxido de sodio. las bacterias también se pueden esterilizar en autoclave. Se utiliza para la separación, purificación o detección de polisacáridos, ácidos nucleicos, virus, ADN superenrollado y complejos macromoleculares.

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