Durante el uso de la columna cromatográfica, habrá una presión de columna alta y una forma de pico deficiente. La razón principal es la contaminación del embalaje de la columna cromatográfica. A continuación se analizarán las causas y soluciones de la contaminación del empaque de la columna cromatográfica.

Análisis de las causas de la contaminación del embalaje.

1. Las muestras de medicina tradicional china tienen componentes complejos. Si el pretratamiento es demasiado simple, es fácil provocar que se acumulen componentes de retención fuertes en el extremo de entrada de la columna cromatográfica, lo que da como resultado un aumento de la presión de la columna, una disminución de la eficiencia de la columna, una forma de pico anormal o apariciones en el cromatograma. “Pico Fantasma”.

2. Acumulación de muestras de proteínas: las muestras biológicas son fáciles de acumular en el extremo superior de la columna, lo que da como resultado una mayor presión de la columna y una menor eficiencia de la columna.

3. Otros: muestras como muestras gelatinosas y floculantes no se pueden eliminar mediante filtración y también se acumularán en la frita y en el extremo de la cabeza de la columna, lo que provocará un aumento de la presión de la columna.

Soluciones

Muestras con componentes complejos como la medicina tradicional china.

1. Durante el desarrollo del método, intente utilizar cartuchos SPE, extracción y otros métodos para eliminar la mayor cantidad de impurezas posible.

2. Al utilizar la precolumna, se debe tener en cuenta que el núcleo de la precolumna es un material consumible y no se puede utilizar durante mucho tiempo sin reemplazarlo. Una vez superada la capacidad de protección del núcleo de la columna, las sustancias fuertemente retenidas seguirán entrando en la columna cromatográfica. Si la presión aumenta más del 10%, se recomienda reemplazar el cartucho.

3. Para que la columna detecte los componentes complejos de la medicina tradicional china, se recomienda realizar un mantenimiento regular de la columna de acuerdo con el método de regeneración anormal del manual de la columna. Material fuertemente retenido en la cabecera de la columna.

4. Si la columna cromatográfica de este tipo de producto tiene sobrepresión o la eficiencia de la columna no cumple con los requisitos, se recomienda que el cliente primero se ocupe del método de regeneración anormal en el manual. Si aún no se puede solucionar, solicite mantenimiento de acuerdo con la normativa pertinente de la empresa.

Acumulación de muestras de proteínas.

1. Utilice métodos de pretratamiento más eficaces, como SPE.

2. Se recomiendan lavados periódicos de mantenimiento de la columna para eliminar los disolventes proteicos (acetonitrilo-agua-ácido trifluoroacético = 50-50-0,1).

3. Utilice una columna de guardia.

4. Por estas razones, una vez que aumenta la presión de la columna y disminuye la eficiencia de la columna, la posibilidad de recuperación después del mantenimiento es muy pequeña. Por lo tanto, se recomienda que los clientes realicen un mantenimiento regular y agreguen columnas de protección durante el uso.

Otros

Las muestras gelatinosas, floculantes y de otro tipo no se pueden eliminar mediante filtración y también se acumularán en la frita y en el extremo de la cabeza de la columna, lo que provocará un aumento de la presión de la columna. En esta categoría, lo mejor es resolverlo en el procesamiento o proceso de muestra.