Durante el uso de la columna cromatográfica, habrá una presión de columna alta y una forma de pico deficiente. El motivo principal es la contaminación del relleno de la columna cromatográfica. A continuación se analizarán las causas y soluciones para la contaminación del empaque de la columna cromatográfica.

Análisis de las causas de la contaminación del embalaje

1. Las muestras de medicina tradicional china tienen componentes complejos. Si el pretratamiento es demasiado simple, es fácil que se acumulen fuertes componentes de retención en el extremo de entrada de la columna cromatográfica, lo que da como resultado un aumento de la presión de la columna, una disminución de la eficiencia de la columna, una forma de pico anormal o aparición en el cromatograma. “Pico Fantasma”.

2. Acumulación de muestras de proteínas: las muestras biológicas son fáciles de acumular en el extremo de cabeza de la columna, lo que aumenta la presión de la columna y reduce la eficiencia de la columna.

3. Otros: las muestras, como las muestras gelatinosas y floculantes, no se pueden eliminar mediante filtración y también se acumularán en la frita y el extremo de la cabeza de la columna, lo que hará que aumente la presión de la columna.

Soluciones

Muestras con componentes complejos como la medicina tradicional china

1. Durante el desarrollo del método, intente utilizar cartuchos SPE, extracción y otros métodos para eliminar tantas impurezas como sea posible.

2. Al usar la precolumna, debe tenerse en cuenta que el núcleo de la precolumna es un material consumible y no puede usarse durante mucho tiempo sin reemplazo. Una vez que se excede la capacidad de protección del núcleo de la columna, las sustancias fuertemente retenidas aún ingresarán a la columna cromatográfica. Si la presión aumenta más del 10%, se recomienda reemplazar el cartucho.

3. Para que la columna detecte los componentes complejos de la medicina tradicional china, se recomienda realizar regularmente el mantenimiento de la columna de acuerdo con el método de regeneración anormal del manual de la columna. Material fuertemente retenido en la cabecera de la columna.

4. Si la columna cromatográfica de este tipo de producto tiene sobrepresión o la eficiencia de la columna no cumple con los requisitos, se recomienda que el cliente trate primero con el método de regeneración anormal en el manual. Si aún no se puede solucionar, solicite el mantenimiento de acuerdo con las normas pertinentes de la empresa.

Acumulación de muestras de proteínas

1. Utilice métodos de pretratamiento más efectivos, como SPE.

2. Se recomiendan lavados periódicos de mantenimiento de la columna para eliminar los disolventes proteicos (acetonitrilo-agua-ácido trifluoroacético = 50-50-0,1).

3. Utilice una columna de protección.

4. Por estas razones, una vez que aumenta la presión de la columna y disminuye la eficiencia de la columna, la posibilidad de recuperación después del mantenimiento es muy pequeña. Por lo tanto, se recomienda que los clientes realicen un mantenimiento regular y agreguen precolumnas durante el uso.

Otros

Las muestras gelatinosas, floculantes y de otro tipo no se pueden eliminar mediante filtración y también se acumularán en la frita y en el extremo de la cabeza de la columna, lo que hará que aumente la presión de la columna. En esta categoría lo mejor es resolverlo en procesamiento de muestra o proceso.