En el proceso de análisis y pruebas, los compuestos con mayor polaridad generalmente no se retienen bien en las columnas no polares convencionales. Incluso si la relación de fases orgánicas se reduce a un nivel muy bajo, es difícil lograr una mejora de la retención, que se ve fácilmente interferida por disolventes o excipientes blancos. Por lo tanto, eliminar la interferencia se ha convertido en una parte muy importante del establecimiento de métodos.

Aplicaciones

La aminobutiramida tiene una alta polaridad, una débil absorción de UV, casi ninguna retención en la columna C18 convencional y el blanco del material auxiliar interfiere con su determinación.

La estructura se muestra en la figura:

Estado original

Columna: Ultisil® AQ-C18 (4,6×250 mm, 5 μm).

Fase móvil: tampón fosfato: acetonitrilo = 95:5;

Analizar

El pico objetivo es polar y no tiene retención en la columna C18. El pico aparece en unos 3 minutos, que coincide con el blanco del material auxiliar y no se puede separar.

azul – pico de excipiente negro – objetivo

Ideas de desarrollo de métodos.

Para separar la sustancia objetivo de los excipientes, se debe mejorar la retención del compuesto objetivo. Hay dos grupos amino en la estructura de esta sustancia, y se puede considerar la determinación del modo de agregar el reactivo de apareamiento iónico en la fase móvil. Combinado con su longitud de onda de detección (205 nm), se puede agregar dodecilsulfato de sodio al sistema de fase móvil para su determinación y ajustarlo mediante el método de optimización puede eliminar la interferencia de los excipientes en blanco sobre las impurezas.

Condiciones cromatográficas ajustadas.

Columna: Ultisil® XB-C18 (4,6×250 mm, 5 μm).

Fase móvil: 0,01 mol/l dihidrógenofosfato de potasio 0,5 g/l dodecilsulfato de sodio (pH 2,5)/acetonitrilo = 70/30.

Analizar

Como se esperaba, la retención del compuesto objetivo mejoró significativamente en este sistema, que no se vio afectado por el blanco de excipientes, y se pudo lograr una mejor retención y separación.