En el proceso de análisis y prueba, los compuestos con mayor polaridad generalmente se retienen mal en las columnas no polares convencionales. Incluso si la proporción de la fase orgánica se reduce a un nivel muy bajo, es difícil lograr una mejora de la retención, que se interfiere fácilmente con los disolventes en blanco o los excipientes en blanco. Por lo tanto, la eliminación de interferencias se ha convertido en una parte muy importante del establecimiento de métodos.

Aplicaciones

La aminobutiramida tiene alta polaridad, débil absorción UV, casi ninguna retención en la columna C18 convencional y el blanco del material auxiliar interfiere con su determinación.

La estructura se muestra en la figura:

Condición original

Columna: Ultisil® AQ-C18 (4,6 × 250 mm, 5 μm).

Fase móvil: tampón de fosfato: acetonitrilo = 95:5;

Analizar

El pico objetivo es polar y no tiene retención en la columna C18. El pico aparece en unos 3 minutos, que coincide con el blanco del material auxiliar y no se puede separar.

azul: pico del excipiente negro: objetivo

ideas de desarrollo de métodos

Para separar la sustancia objetivo de los excipientes, se debe mejorar la retención del compuesto objetivo. Hay dos grupos amino en la estructura de esta sustancia, y se puede considerar la determinación del modo de agregar reactivo de emparejamiento de iones en la fase móvil. Combinado con su longitud de onda de detección (205nm), el dodecilsulfato de sodio puede agregarse al sistema de fase móvil para la determinación y ajustarse mediante el método. La optimización puede eliminar la interferencia de los excipientes en blanco con las impurezas.

Condiciones cromatográficas ajustadas

Columna: Ultisil® XB-C18 (4,6 × 250 mm, 5 μm).

Fase móvil: 0,01 mol/L de dihidrógeno fosfato de potasio 0,5 g/L de dodecilsulfato de sodio (pH 2,5)/acetonitrilo=70/30.

Analizar

Como era de esperar, la retención del compuesto objetivo mejoró significativamente en este sistema, que no se vio afectado por el blanco de excipientes, y se pudo lograr una mejor retención y separación.