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2025-02-21Creo que todos encontrarán en las pruebas diarias que existen tres parámetros: factor de cola, factor de simetría y factor de asimetría para evaluar la simetría de la forma del pico de un pico cromatográfico. El software de análisis utilizado actualmente, el factor de simetría en la estación de trabajo ChemStation, el factor de cola USP en la estación de trabajo Empower y la estación de trabajo Chameleon no tienen el parámetro del factor de simetría, que se evalúa por el grado de asimetría. ¿Cuál es la relación entre estos tres parámetros y cuál es la diferencia? Hoy os hablaré de ello.
Idealmente, los picos cromatográficos deberían tener características gaussianas:
donde χ es igual a (t-tR)/σ, t es el tiempo, σ=W/4 e y es la altura del pico. Los picos verdaderos en un cromatograma generalmente se desvían ligeramente de una forma de pico gaussiana simétrica, a menudo con más o menos cola. Como se muestra a continuación:
Factor de cola: El factor de cola generalmente se expresa como Tf, que se calcula al 5% de la altura del pico.
Factor de asimetría: El factor de asimetría suele expresarse como As, calculado al 10% de la altura del pico.
Factor de simetría: El factor de simetría suele estar representado por S y tiene una relación recíproca con el factor de asimetría As.
La relación entre los valores de As y Tf se puede expresar aproximadamente como:
As≈1 1.5(Tf-1)
Por tanto, en general, el valor de As es mayor que el valor de Tf hasta cierto punto.
Relación entre el factor de cola máxima y el factor de asimetría
Factor de asimetría máxima (medido al 10% de la altura máxima) | Factor de cola de pico (medido al 5% de la altura del pico) |
1.0 | 1.0 |
0.00 | 1.2 |
1.6 | 1.4 |
1.9 | 1.6 |
2.2 | 1.8 |
2.5 | 2.0 |
La forma del pico varía con el factor de asimetría (As) y el factor de cola (Tf). Cuando As o Tf = 1,0, corresponde a un pico cromatográfico perfectamente simétrico, en cuyo caso los dos picos cromatográficos pueden estar bien separados entre sí. Sin embargo, a medida que aumenta la cola de picos, también aumenta la separación entre ellos. En la mayoría de los casos, el grado de cola del pico no es severo (Tf < 1,2) y generalmente pasa desapercibido. Este grado de cola (Tf < 1,2) tiene un efecto insignificante sobre la separación, a menos que a un pico muy grande le siga un pico muy pequeño.
Discusión sobre el rango especificado de factor de cola, factor simétrico y factor asimétrico
La Farmacopea China (CP) exige que el factor de cola esté en el rango de 0,95 a 1,05. Existe una premisa aplicable, es decir, la Farmacopea China estipula que el factor de cola debe estar entre 0,95 y 1,05 cuando se utiliza el método de altura del pico para la cuantificación. Si es inferior a 0,95, es un retraso. Los picos por encima de 1,05 son picos de cola.
Cuando la Farmacopea Europea (EP) y la Farmacopea Británica (BP) estipulan la determinación de sustancias o contenidos relacionados, a menos que se especifique lo contrario, el factor de simetría del pico cromatográfico de la solución de referencia cuantitativa en el cromatograma debe ser de 0,8 a 1,5.
La Farmacopea de los Estados Unidos (USP) exige un factor de cola no superior a 2,0 para algunos compuestos.
La gama de factores de cola no se especifica en la Farmacopea Japonesa (JP).
A juzgar por las limitaciones sobre el alcance del factor de cola en la farmacopea de varios países, no existe un estándar para determinar el rango de valores del factor de cola y es necesario analizar problemas específicos en experimentos cromatográficos reales.
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